USH2A Gene Editing Using the CRISPR System

Fecha de publicación: 15/09/2017

Autores de IIS La Fe

Carla Fuster García

Autor
Gema García García

Autor
Elisa González Romero

Autor
Teresa Jaijo Sanchís

Autor
María Dolores Sequedo Pérez

Autor
Carmen Ayuso Garcia

Autor
Rafael Vázquez Manrique

Autor
José María Millán Salvador

Autor
Elena María Aller Mañas

Autor

Grupos

Biomedicina Molecular, Celular y Genómica

Leader

José María Millán Salvador
Unidad mixta de investigación en enfermedades raras (CIPF)

Leader

José María Millán Salvador

Abstract

Usher syndrome (USH) is a rare autosomal recessive disease and the most common inherited form of combined visual and hearing impairment. Up to 13 genes are associated with this disorder, with USH2A being the most prevalent, due partially to the recurrence rate of the c.2299delG mutation. Excluding hearing aids or cochlear implants for hearing impairment, there are no medical solutions available to treat USH patients. The repair of specific mutations by gene editing is, therefore, an interesting strategy that can be explored using the CRISPR/Cas9 system. In this study, this method of gene editing is used to target the c.2299delG mutation on fibroblasts from an USH patient carrying the mutation in homozygosis. Successful in vitro mutation repair was demonstrated using locus-specific RNA-Cas9 ribonucleoproteins with subsequent homologous recombination repair induced by an engineered template supply. Effects on predicted off-target sites in the CRISPR-treated cells were discarded after a targeted deep-sequencing screen. The proven effectiveness and specificity of these correction tools, applied to the c.2299delG pathogenic variant of USH2A, indicates that the CRISPR system should be considered to further explore a potential treatment of USH.

Datos de la publicación

ISSN/ISSNe:: 2162-2531, 2162-2531
Tipo:: Article
Páginas:: 529-541
DOI:: 10.1016/j.omtn.2017.08.003
Enlace a otro recurso:: www.ncbi.nlm
Factor de Impacto:: 2,523 SCImago ℠
Cuartil:: Q1 SCImago ℠

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Keywords

CRISPR; RNPs; USH2A; Usher syndrome; c.2299delG; gene editing

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