Bypassing hazard of housekeeping genes: their evaluation in rat granule neurons treated with cerebrospinal fluid of multiple sclerosis subjects

Autores de IIS La Fe
Participantes ajenos a IIS La Fe
- Mathur D
- Urena-Peralta JR
- Lopez-Rodas G
- Burgal-Marti M
Grupos
Abstract
Gene expression studies employing real-time PCR has become an intrinsic part of biomedical research. Appropriate normalization of target gene transcript(s) based on stably expressed housekeeping genes is crucial in individual experimental conditions to obtain accurate results. In multiple sclerosis (MS), several gene expression studies have been undertaken, however, the suitability of housekeeping genes to express stably in this disease is not yet explored. Recent research suggests that their expression level may vary under different experimental conditions. Hence it is indispensible to evaluate their expression stability to accurately normalize target gene transcripts. The present study aims to evaluate the expression stability of seven housekeeping genes in rat granule neurons treated with cerebrospinal fluid of MS patients. The selected reference genes were quantified by real time PCR and their expression stability was assessed using GeNorm and NormFinder algorithms. GeNorm identified transferrin receptor (Tfrc) and microglobulin beta-2 (B2m) the most stable genes followed by ribosomal protein L19 (Rp119) whereas -actin (ActB) and glyceraldehyde-3-phosphate-dehydrogenase (Gapdh) the most fluctuated ones in these neurons. NormFinder identified Tfrc as the best invariable gene followed by B2m and Rp119. ActB and Gapdh were the least stable genes as analyzed by NormFinder algorithm. Both methods reported Tfrc and B2m the most stably expressed genes and Gapdh the least stable one. Altogether our data demonstrate the significance of pre-validation of housekeeping genes for accurate normalization and indicates Tfrc and B2m as best endogenous controls in MS. ActB and Gapdh are not recommended in gene expression studies related to current one.
Datos de la publicación
- ISSN/ISSNe:
- 1662-5102, 1662-5102
- Tipo:
- Article
- Páginas:
- 375-375
- Factor de Impacto:
- 2,260 SCImago ℠
- Cuartil:
- Q1 SCImago ℠
FRONTIERS IN CELLULAR NEUROSCIENCE FRONTIERS MEDIA SA
Citas Recibidas en Web of Science: 8
Documentos
- No hay documentos
Filiaciones
Keywords
- housekeeping genes; multiple sclerosis; normalization; GeNorm; NormFinder
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Investigador Principal: BONAVENTURA CASANOVA ESTRUCH
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Cita
Mathur D,Urena JR,Lopez G,Casanova B,Coret F,Burgal M. Bypassing hazard of housekeeping genes: their evaluation in rat granule neurons treated with cerebrospinal fluid of multiple sclerosis subjects. Front Cell Neurosci. 2015. 9. p. 375-375. IF:4,609. (1).